Respuesta Inmunitaria y Biomarcadores

El Servicio de Respuesta Inmune y Biomarcadores proporciona cuantificación avanzada de una amplia gama de biomarcadores en diversos tipos de muestras biológicas, utilizando tecnologías como ELISA, xMAP Luminex y proteómica dirigida con OLINK (Certified International Core Lab).

Los biomarcadores analizados son principalmente proteínas, incluyendo anticuerpos de diferentes isotipos y subclases frente a paneles de antígenos personalizados, así como otros analitos relacionados con el sistema inmunitario como citocinas, quimiocinas y factores de crecimiento. Además, también pueden evaluarse biomarcadores asociados a otras vías fisiológicas, incluyendo procesos metabólicos, neurológicos y cardiovasculares.

Las principales fortalezas de la plataforma incluyen:

• Capacidad de multiplexado, que permite generar datos multiparamétricos a partir de una sola muestra (Luminex y OLINK).
• Miniaturización, adecuada para estudios con volúmenes limitados de muestra (p. ej., cohortes pediátricas).
• Versatilidad y adaptabilidad (necesidades personalizadas; kits comerciales o desarrollados internamente).
• Alta capacidad de procesamiento mediante sistemas semiautomatizados de manejo de líquidos.
• Ensayos funcionales de anticuerpos (p. ej., inhibición de unión y neutralización subrogada).
• Complementariedad de tecnologías, que permite la validación cruzada de biomarcadores (p. ej., Luminex vs OLINK para citocinas y otros biomarcadores).

Se desarrollan paneles personalizados utilizando proteínas recombinantes (comerciales o producidas internamente en sistemas procariotas o eucariotas) y anticuerpos monoclonales (mAbs) para aplicaciones específicas. Esto permite un fenotipado inmunológico en profundidad, mediante citometría espectral, así como el análisis de respuestas específicas de células T mediante tinción intracelular de citocinas (ICS) y ensayos de marcadores inducidos por activación (AIM), junto con citometría de flujo y ensayos ELIspot/FluoroSpot.

Se ofrecen las siguientes capacidades y conocimientos específicos como valor añadido:

• Amplia experiencia en monitorización inmunológica.
• Trayectoria consolidada del equipo.
• Control de calidad (QA/QC) integrado y pipelines de preprocesamiento en R.
• Posibilidad de realizar análisis estadísticos, asesoramiento, formación y desarrollo de capacidades para personal de laboratorio en países de renta baja y media (LMIC).

Servicios

• Ensayos ELISA y colorimétricos mediante kits comerciales o desarrollados internamente para medir concentraciones de diferentes analitos.
• Ensayos multiplex de citocinas mediante Luminex con kits comerciales para medir proteínas como citocinas, quimiocinas, factores de crecimiento u otros, así como expresión génica mediante paneles Invitrogen™ QuantiGene™ Plex.
• Ensayos multiplex de anticuerpos mediante Luminex desarrollados por el grupo para medir niveles y avidez de IgM, IgA, IgA1, IgA2, IgG, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 e IgE frente a paneles flexibles de antígenos de distintos microorganismos.
• Ensayos funcionales de anticuerpos mediante Luminex.
• Ensayos Olink con kits comerciales para medir hasta 92 biomarcadores en formato multiplex (T96, T48 y 21-Flex) (Certified International CoreLab).
• Otros ensayos celulares (células T, células B) bajo demanda (citometría de flujo, ELIspot/FluoroSpot). Para estas tecnologías se ofrece:
  • Asesoramiento sobre marcadores, tecnologías (ELISA, Luminex, Olink) y kits según los objetivos del estudio.
  • Diseño experimental.
  • Contacto con proveedores y elaboración de presupuestos.
  • Compra de reactivos y kits.
  • Ejecución de ensayos.
  • Control de calidad (QA/QC) de los datos generados.
  • Adicionalmente: citometría de flujo y ELIspot/FluoroSpot (adquisición/lectura mediante la plataforma IDIBAPS).

Equipamiento

• CytoFLEX (Beckman Coulter)
• Acceso a la unidad de citometría de flujo del PCB (Cytek Aurora; 4 láseres, espectral)
• Acceso al lector de microplacas ELISA del PCB (lector de microplacas TECAN Infinite® M Plex)
• Dos lavadores automáticos (BioTek)
• Equipos Luminex: un Magpix, un Luminex 100/200 y dos FlexMap3D
• Accesorios para ensayos Luminex:
  • Kingfisher Flex 96 deepwell (Thermo Fisher) para acoplamiento automático de antígenos
  • Integra Assist Plus e Integra Viaflo 384 (Integra) para manejo de líquidos en placas de 384 pocillos
  • Dos agitadores orbitales para placas de 96 pocillos (Thermo Fisher)
  • Dos agitadores orbitales para placas de 384 pocillos (Heidolph Titramax)
• Guava easyCyte para recuento automático de microesferas y células
• OLINK Signature Q100
• Accesorios para ensayos OLINK:
  • Placas de interfaz Signature Q100: 96.96, 48.48 y 24.192
  • Centrífuga para placas (Eppendorf 5430/5430R)
  • Microcentrífuga para tubos (IKA Mini G, Fisher Scientific)
  • Vortex controlado para placas (MaxMate Eppendorf)
  • Soporte de tubos para vortex (MixMate PCR 96, Eppendorf)
  • Pipetas de precisión mono y multicanal (Rainin, Mettler Toledo)
  • Bloque de congelación (-20ºC) para manejo enzimático
  • Termociclador PCR (SimpliAMP, Applied Biosystems)
• Software para ELISA (GraphPad Prism), Luminex (Xponent 4.3), Olink (NPX Signature) y citometría de flujo (FlowJo)
• Ella™ automated ELISA (Bio-Techne)

Este servicio científico (core facility) forma parte de la plataforma CERCAGINYS.

Control de calidad

• Política de calidad
• Certificado ISO 9001
• Certificado Olink

Proyectos seleccionados

• ATHLETE - Advancing Tools for Human Early Lifecourse Exposome Research and Translation
  Organismo financiador: EU-H2020
  Estado: En ejecución
• BISC - Barcelona Life Study Cohort
  Organismo financiador: EIC-HEI
  Estado: Finalizado
• COVICAT - Cohort Covid-19 en Catalunya
  Organismo financiador: CERCA, EIT Health, “la Caixa” Social Research Grant SR20-01024
  Estado: En ejecución
• EPHOR - Exposome Project for Health and Occupational Research
  Organismo financiador: EU-TNO (NED)
  Estado: En ejecución
• BASEMALVAC - Baseline host and environmental factors that impact pre-erythrocytic malaria vaccine (hypo)responsiveness in endemic regions
  Organismo financiador: NIAID-NIH (USA) et al.
  Estado: En ejecución
• END-VOC - Ending COVID-19 variants of concern through cohort studies
  Referencia: HORIZON-HLTH-2021-CORONA-01-02
  Organismo financiador: EU-HE
  Estado: En ejecución
• INCENTIVE - Indo-European Consortium for Next Generation Influenza Vaccine Innovation
  Organismo financiador: EU-H2020
  Estado: En ejecución
• Impact of coinfections on the balance of antibody and T helper responses to antigen targets of naturally acquired and vaccine immunity to major human pathogens
  Organismo financiador: ISCIII
  Estado: Finalizado
• Infection acquisition in early life and health outcomes in childhood
  Organismo financiador: Fundació La Marató de TV3
  Estado: Finalizado
• CoViproteHCt - Identifying protective immunity to SARS-CoV-2 in Health Care Personnel
  Organismo financiador: EIT Health
  Estado: Finalizado
• ANTICOV-IMMUNO - The impact of COVID-19 treatment on the type, strength and duration of antibody and cellular immune responses in SARS-CoV-2 patients in sub-Saharan Africa
  Organismo financiador: UNITAID
  Estado: Finalizado

Publicaciones seleccionadas

• Evaluation of the accuracy of a multi-infection screening test based on a multiplex immunoassay targeting imported diseases common in migrant populations
  Aguilar R, Cruz A, Jiménez A, et al.; Requena-Méndez A.
  Travel Medicine and Infectious Disease. 2023;57:102681.
  DOI: 10.1016/j.tmaid.2023.102681
• Individual blood concentrations of persistent organic pollutants and chemical elements, and COVID-19: A prospective cohort study in Barcelona
  Porta M, Pumarega J, Gasul M, et al.; Moncunill G, Aguilar R.
  Environmental Research. 2023;223.
  DOI: 10.1016/j.envres.2023.115419
• Long-term exposure to air pollution and COVID-19 vaccine antibody response in a general population cohort (COVICAT Study, Catalonia)
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  Environmental Health Perspectives. 2023;131(4):04700.
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• RBD-based ELISA and Luminex predict anti-SARS-CoV-2 surrogate-neutralising activity in two longitudinal cohorts of German and Spanish healthcare workers
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  DOI: 10.1128/spectrum.03165-22
• Evaluation of antibody serology to determine current helminth and Plasmodium falciparum infections in a co-endemic area in southern Mozambique
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• SARS-CoV-2 infection, vaccination, and antibody response trajectories in adults: A cohort study in Catalonia
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  BMC Medicine. 2022;20(1):347.
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• HIV infection and placental malaria reduce maternal transfer of multiple antimalarial antibodies in Mozambican women
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  Journal of Infection. 2021;82(4):45–57.
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• Highly sensitive and specific multiplex antibody assays to quantify immunoglobulins M, A, and G against SARS-CoV-2 antigens
  Dobaño C, Vidal M, Santano R, Moncunill G.
  Journal of Clinical Microbiology. 2021;59(2).
  DOI: 10.1128/JCM.01731-20
• Seven-month kinetics of SARS-CoV-2 antibodies and role of pre-existing antibodies to human coronaviruses
  Ortega N, Ribes M, Vidal M, Dobaño C.
  Nature Communications. 2021;12(1):4740.
  DOI: 10.1038/s41467-021-24979-9
• Antibody responses to the RTS,S/AS01E vaccine and Plasmodium falciparum antigens after a booster dose within the phase 3 trial in Mozambique
  Sánchez L, Vidal M, Jaroice C, Dobaño C.
  NPJ Vaccines. 2020;5:46.
  DOI: 10.1038/s41541-020-0192-7
• A balanced proinflammatory and regulatory cytokine signature in young African children is associated with lower risk of clinical malaria
  Dobaño C, Nhabomba AJ, Manaca MN, Alonso PL.
  Clinical Infectious Diseases. 2019;69(5):820–828.
  DOI: 10.1093/cid/ciy934